Le variant de la maladie de Creutzfeldt-Jakob (vMCJ) est une maladie à prion rare d’incubation longue et dont l’issue est toujours fatale. Malgré le déclin de l’épidémie dans le monde, des incertitudes demeurent quant à la prévalence dans la population générale de porteurs asymptomatiques potentiellement capables de transmettre la maladie par transfusion sanguine ou par d’autres procédures médicales. Nous avons développé un test de dépistage suffisamment sensible pour identifier les patients vMCJ plus de 2 ans avant l’apparition des symptômes.

Automatiser le test de détection du vMCJ dans le plasma.

Le test comprend 3 étapes :

– capture du prion dans le plasma à l’aide de nanobilles magnétiques recouverte de plasminogène ;

– amplification in vitro du prion vMCJ par PMCA (Protein Misfolding Cyclic Amplification) ;

– détection par Western-Blot du profil caractéristique de la protéine prion vMCJ.

Après automatisation de la phase de capture (automate Tecan Evo 100), la PMCA a été optimisée en format microplaque et une technique ELISA de détection du prion a été développée en remplacement du Western-blot.

Après intégration des 3 étapes, le test de 2^e génération a été validé sur 72 échantillons contrôles avec une sensibilité identique au test manuel et le maintien d’une spécificité de 100 %.

L’utilisation du test automatisé permet d’analyser 86 échantillons simultanément au lieu de 24 manuellement et permet donc d’augmenter la cadence d’un facteur 3,5. Ce test de 2^e génération pourra permettre de réaliser des études de prévalence dans les populations à risque comme celle des polytransfusés.